Milieu de Knudson pour orchidées

Le milieu Knudson est un substrat nutritif artificiel développé en 1946 par le botaniste américain Lewis Knudson pour la germination des graines d'orchidées et favoriser leur croissance en conditions stériles. C'est l'un des milieux les plus utilisés pour la culture in vitro des orchidées, tant en laboratoire qu'à domicile.

Qu'est-ce que le médium Knudson?

Les orchidées poussent naturellement en symbiose avec des champignons mycorhiziens, qui leur fournissent des nutriments essentiels. Cependant, reproduire cette symbiose en laboratoire est impossible. Le milieu Knudson a été développé comme substitut riche en nutriments, fournissant tous les éléments essentiels à la germination des graines et à la croissance des plantules.

Composition du milieu de Knudson

La formule standard comprend:

• Le sucre: une source d’énergie primaire.
• Sels minéraux:
  • Nitrate de potassium (kno₃) – une source d’azote.
  • Sulfate de magnésium (mgso₄) – fournit du magnésium et du soufre.
  • Phosphate dihydrogéné de potassium (kh₂po₄) – fournit du phosphore et du potassium.
  • Chlorure de calcium (cacl₂) – une source de calcium.
• Vitamines:
  • Acide nicotinique, thiamine et pyridoxine pour activer les processus métaboliques.
  • Fer, zinc, manganèse et autres éléments essentiels au développement des tissus.
  • L'agar-agar permet de créer un milieu solide, empêchant les graines ou les semis de couler.
• Oligo-éléments:
• Agents gélifiants:

Avantages de l'utilisation du médium Knudson

1. Stimule la germination des graines:
   • Fournit tous les nutriments nécessaires à la germination, remplaçant le besoin de symbiose fongique.
2. Environnement stérile:
   • Crée des conditions idéales pour la croissance sans risque de contamination bactérienne ou fongique.
3. Conditions de croissance optimales:
   • Favorise le développement des semis jusqu’à ce qu’ils soient prêts à être transplantés dans un substrat.
4. Convient à différentes espèces d'orchidées:
   • La formule peut être ajustée pour répondre aux besoins spécifiques des différents types d’orchidées.

Applications du milieu Knudson

1. Germination des graines:
   • Les graines d'orchidées sont stérilisées (généralement avec une solution d'hypochlorite de sodium).
   • Les graines stériles sont placées à la surface du milieu nutritif dans des boîtes de Pétri ou des tubes à essai.
2. Croissance des semis:
   • Le milieu favorise le développement des semis jusqu’à l’émergence des feuilles et des systèmes racinaires initiaux.
3. Transplantation dans le substrat:
   • Une fois que les semis atteignent une taille appropriée, ils sont transplantés dans un substrat approprié (par exemple, de l'écorce, de la mousse de sphaigne).

Comment préparer le milieu Knudson?

Ingrédients (exemple pour 1 litre):

• Agar-agar: 10 g
• Sucre: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• Mgso₄·7h₂o: 250 mg
• Cacl₂·2h₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitamines (thiamine, acide nicotinique): 1 mg chacune
• Microéléments (par exemple, feso₄): 1–2 mg
• Eau distillée: 1 l

Mesures:

1. Dissoudre tous les composants dans de l’eau distillée.
2. Ajoutez l’agar-agar et chauffez pour le dissoudre complètement.
3. Verser la solution dans des récipients stériles (boîtes de Petri, tubes à essai).
4. Stériliser le milieu dans un autoclave ou un bain-marie (15 minutes à 121°c).
5. Refroidir le milieu pour lui permettre de se solidifier.

Conseils d'utilisation du médium Knudson

1. Maintenir la stérilité:
   • Travailler dans des conditions stériles pour éviter toute contamination.
2. Surveiller la température:
   • Conserver les cultures à +20–25°C.
3. Fournir un éclairage adéquat:
   • Assurez un éclairage doux et diffus pendant 12 à 14 heures par jour.
4. Transplantation:
   • Transférez les semis dans un substrat une fois qu’ils sont suffisamment grands pour une croissance indépendante.

Conclusion

Le milieu Knudson est essentiel pour réussir la germination des graines d'orchidées et cultiver des semis sains. Il offre un équilibre parfait de nutriments pour la croissance, éliminant ainsi le besoin de symbiose fongique. Ce milieu est idéal pour la multiplication d'espèces d'orchidées rares et décoratives, que ce soit en laboratoire ou à la maison.